本次实验的主要目的是利用单通道细胞破碎仪高效地破碎双歧杆菌,以释放细胞内的蛋白质和其他生物大分子,为后续的生物化学分析和研究提供材料。
1、实验设备
深那单通道细胞破碎仪
单通道细胞破碎仪是一种应用于实验室和小批量液体处理的超声设备,可安全处理各种有机和无机材料。典型应用包括纳米技术(生产纳米颗粒材料和石墨烯分散体)、细胞裂解、样品制备、均质化、ChIP 分析、乳化、解聚,以及在生化学处理领域的应用。
2、实验过程
样品准备:
①将双歧杆菌培养物放入离心管中,以8000 rpm离心10分钟,收集菌体。
②弃上清,用PBS缓冲液重悬菌体,重复洗涤两次。
超声波破碎:
将细胞样品分装至离心管中,并在冰浴条件下进行超声破碎。启动单通道细胞破碎仪,调整探头没入液面深度,并设置合适的频率、功率、超声时间和间隔时间等数值,以实现有效的细胞破碎。
深那细胞破碎仪
超声波细胞破碎仪参数设置
深那细胞破碎仪
注意事项:
①超声处理过程中需保持样品冷却,防止温度升高影响细胞裂解效果;
②及时清洁超声波探头,防止不同样品间的交叉污染;
③细胞破碎仪对大肠杆菌、双歧杆菌破损率极高,酵母破碎率相对有限;
④适用于细胞悬浮液小规模处理,生物实验室必备,破碎效率高。
样品处理:
超声破碎后,将样品再次以8000 rpm离心10分钟,收集上清液(破碎后的细胞裂解液)。
上清液即为破碎后的细胞内容物,可用于后续的蛋白质分析或其他实验。
3、实验结果分析
深那细胞破碎仪
实验成功实现了双歧杆菌细胞的破碎,上清液中检测到预期的蛋白质和其他生物大分子,表明细胞内容物已被有效释放。
通过上述实验过程和结果,我们可以看到单通道细胞破碎仪在生物化学研究中的应用优势,特别是在需要高效细胞破碎和成分提取的实验中。这些优势使得单通道细胞破碎仪在生物工程、环境科学、生物研究、食品研究等领域具有广泛的应用。
应用优势: